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其应用价值也各不相同

发布时间:2025-07-18 20:08:46 作者:jpj 点击:8 【 字体:

迷迭香现在全世界各国广泛栽培。溶剂迷迭香中含有多种化学物质,法纯主要成分为黄酮类、化迷萜类、迭香有机酸类和其他类,酸研萜类是溶剂含量最多的一类,目前已经分离鉴定的法纯化合物有迷迭香酸、鼠尾草酚、化迷鼠尾草酸、迭香齐墩果酸和熊果酸。酸研迷迭香酸易溶于甲醇、溶剂乙醇水溶液、法纯水,化迷而难溶于氯仿、迭香石油醚等有机溶剂;耐高温能力强,酸研可耐受长期240℃高温油炸而保持高抗氧化能力,可代替热不稳定的超氧化物歧化酶SOD作为自由基清除剂。迷迭香酸在不同植物中的含量各异,其应用价值也各不相同。迷迭香酸提取纯化方法主要有水提法、有机溶剂提取法、超声辅助提取法、微波辅助提取法、膜分离技术、大孔树脂吸附法、结晶法等。水提法既提取出水溶性有效成分,同时也提出一些水溶性杂质,如水提法分离的迷迭香酸粗品中含有较多的焦糖色素、蛋白和多糖类杂质,为后续纯化增加了困难。超声波和微波辅助提取法具有提取效率高、提取时间短的优点,但均为辅助提取方法,且需超声或微波设备。有机溶剂提取法可以有效减少一些水溶性杂质的溶出,便于后续的分离和纯化。目前采用乙醇提取得到的迷迭香酸粗品含量基本在3~6%。

本文以5%含量的迷迭香酸粗品为原料,优选萃取剂种类、萃取时间、次数、时间等因素,使产品中迷迭香酸含量大于≥35%(GB1886.172—2016《食品添加剂迷迭香提取物》要求大于5%),并且实现脱色,为实施迷迭香酸的工业化生产及应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

实验所用乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙醚、石油醚、正丁醇、三氯甲烷、正己烷、重铬酸钾、硫酸钴、盐酸等分析纯试剂均采购国药集团化学试剂有限公司。迷迭香干叶由河南尚佳农业科技有限公司提供。迷迭香酸标准品(含量:98%),购自西安利时生物科技有限公司。

1.2 仪器与设备

1260高效液相色谱仪:安捷伦科技有限公司;752N紫外可见分光光度计:上海精密科学仪器有限公司;GL-20G-C高速冷冻离心机:上海安亭科学仪器厂;BSA224S-CW电子天平:赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;RE-52A旋转蒸发器:上海亚荣生化仪器厂;RNF-0460卷式膜多功能小试设备:厦门世达膜科技有限公司;YC-1800喷雾干燥机:上海雅程仪器设备有限公司;20升多功能提取系统:河南宁烁仪器设备有限公司。

1.3 迷迭香酸粗品制备

取迷迭香干叶按1∶10加含75%乙醇水溶液(pH=2),加入到20L萃取罐中,85℃回流提取1.0h,放出萃取液,再加入8倍75%乙醇水溶液(pH=2),回流提取1.0h离心后,合并提取液,过四层纱布,闪蒸仪浓缩蒸馏出酒精,卷式膜过滤,喷雾干燥得含量约为5%粗品。

1.4 迷迭香酸含量及色度测定

1.4.1 标准品及样品配制

用甲醇溶解标准品配置成0.2mg/mL迷迭香酸标准溶液。

将待测迷迭香酸粗品配制为2mg/mL的水溶液(pH=2),测定色度和迷迭香酸含量。

1.4.2 高效液相色谱法测定迷迭香酸含量

色谱条件:二极管阵列检测器(DAD),流动相为甲醇∶水=60∶40,流速为1mL/min,进样量为10μL。

1.4.3 色度标准曲线的绘制及脱色率的计算

(1)色度标准曲线的绘制

标准色度单位:1L水中溶解有1mg铂和0.5mg钴,称该溶液所具有的色度为1度。500色度标准使用液配制:称取0.0437g重铬酸钾和1.0g硫酸钴,加水溶解后继续加入0.5mL硫酸,配成500mL的溶液。以蒸馏水为对照液,在340nm~360nm的波长范围内测定500色度标准使用液的吸光度,选出最大吸收波长。分别用移液枪移取1mL、2mL、3mL、4mL500色度标准使用液到四个5mL容量瓶中,加蒸馏水定容(稀释后,色度分别是100、200、300、400)。在最大波长处测吸光值。以溶液色度为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘制色度标准曲线。

(2)计算脱色率:

将提取液稀释一定的倍数,在最大波长处测吸光值,将吸光值代入色度线性回归方程,求得产品色度。脱色率按下式计算:
 

1.5 萃取溶剂的选择

称取9份10g原料,用60mL酸水溶解,离心去除不溶物。分别用1.0倍体积的乙醚、乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丁酯、乙醚、石油醚、正丁醇、三氯甲烷、正己烷进行萃取,共萃取两次,采用高效液相色谱仪检测上下相中迷迭香酸的含量,确定最佳的两相分配工艺。

1.6 溶剂萃取工艺优化实验设计

1.6.1 正丁醇萃取水相和含醇水相迷迭香酸的分配情况

分别用15%乙醇和纯水溶解含量为90%的迷迭香酸样品配制成0.2mg/mL样液,加入等体积的正丁醇进行萃取,各重复3份,测定上下相中迷迭香酸的含量。

1.6.2 正丁醇萃取不同pH水相迷迭香酸的分配情况

分别以不同pH的水相溶解含量为90%的迷迭香酸样品,用等体积正丁醇萃取,分相后,高效液相色谱法检测上下相中迷迭香酸的含量及分配情况。

1.6.3 萃取剂的选择

按料液比1∶8加入酸水溶解迷迭香粗提物,离心去除不溶物,分别用乙醚、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、三氯甲烷、正丁醇、石油醚、正己烷萃取按照1∶1的体积比进行萃取,共萃取两次,检测两次萃取后上相和最后的下相迷迭香酸的含量。

1.6.4 四种萃取剂的对比实验

选用含量为5%的迷迭香酸粗品,用pH2~3的酸水溶解配制为1mg/mL样液,分别用等体积的正丁醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯和乙酸甲酯萃取后,测定所得产品的色度及迷迭香酸的含量,确定最佳的萃取剂。

1.6.5 正交试验设计

设计L9(34)的三因素三水平正交实验考察萃取剂种类、萃取水相的pH和萃取剂用量(为水相的倍数)对脱色率及含量的影响。

1.7 数据处理

采用SPSS16软件进行数据分析。

声明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系

相关链接:迷迭香酸硫酸钴乙酸甲酯石油醚

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